Ионно-парная хроматография

Рис. 1. Хроматограмма витаминов, полученная на колонке размером 300 Х 4 мм с µ-бондапаком C18, подвижная фаза – метанол – вода (70: 30) с 0,1% В7 и В5 (1:1), расход 1 мл/мин, детектор–УФ (254 нм): 1 – никотинамид; 2 – пиродоксин; 3 – рибофлавин; 4 – тиамин

Рис. 2. Хроматограмма изомеров фталевой кислоты, полученная на колонке размером 300 Х 4 мм с µ-бондапаком C18, подвижная фаза – вода с добавкой реактива А, метанол с добавкой реактива А, градиент от 5 до 40% метанола за 15 мин, скорость потока 2 мл/мин, детектор – УФ (254 нм): 1 – терефталевая кислота; 2 – ортофталевая кислота; 3 – изофталевая кислота

Необходимо, чтобы противоион растворялся в элюенте. Неправильный выбор противоиона может привести к образованию осадка, что вызовет возрастание значений k', размывание пика и заметное повышение давления на входе. Концентрация обычно колеблется от 0,01 М для противоиона с малой длиной цепи до 0,005 М для противоиона с более длинной цепью.

Для препаративных разделений ион-парную хроматографию не применяют, а количество вводимого образца сопоставимо с количествами, применяемыми для распределительной хроматографии. Увеличение максимально вводимого количества может быть достигнуто за счет предварительного образования ионных пар в образце. Для некоторых ионизированных (независимо от рН) анионов и катионов не требуется добавка буфера. Кислоты обычно разделяются при рН=4–7,4, а основания – при рН=2–5. При этом значения рН подвижной фазы могут для улучшения селективности разделения варьироваться.

Следует помнить, что ион-парная хроматография на обращенной фазе в целом метод более грубый, чем разделение на обращенной фазе, и должен использоваться, когда неприменимы распределительная хроматография на обращенной фазе или метод подавления ионов.

Литература

1. Baker D.R., George S. A/Amer. Lab., 1980, v. 12, No. 1, p. 41–46.

2. Bly D.D./Anal Chem, 1969, v. 41, No. 2, p. 477–480.

3. Drott E.E. //in Chromatographic Science Series, v. 8, Liquid Chromatography of Polymers and Related Materials, ed. J. Gazes. N.Y., M. Dekker, 1977, p. 41.

4. Krishen A., Tucker R.G./Anal. Chem., 1977, v. 49, No. 4, p. 898.

5. Mori S., Yamakctwa A./J. Liquid Chromatogr., 1980, v. 3, No. 3, p. 329 – 342.

6. Verzele M., Geeraert E./J. Chromatogr. Sci, 1980, v. 18, No. 10, p. 559 – 570.

7. Nettleton D.E./J. Liquid Chromatogr, 1981, suppl. No. 2, p. 359–398.

8. Rable F.M./International Lab, 1980, v. 10, No. 8, p. 91–98.

9. Small Bore Liquid Chromatography Columns //ed. R.P.W. Scott. N.Y., J. Wiley, 1984. 294 p.

10.Microcolumn High-Performance Liquid Chromatography //ed. P. Kucera. N. Y, Elsevier, 1984. 302 p.

11.Scott R.P.W., Kucera P./J. Chromatogr, 1979, v. 169, p. 51–62.

12.Scott R.P.W., Kucera P./J. Chromatogr, 1979, v. 185, p. 22–31.

13.Scott R.P.W./J. Chromatogr. Sci, 1980, v. 18, No. 1, p. 49–54.

14.Reese R.E., Scott R.P.W./J. Chromatogr. Sci, 1980, v. 18, No. 8, p. 479 – 486.

15.Scott R.P.W., Simpson C.F./J. Chromatogr. Sci, 1981, v. 19, No. 5, 224–233.